海藻

另味怪友
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2020年06月08日 13:35
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二、海藻多糖促双歧杆菌生长实验
(一)实验材料
1.样品
羊栖菜多糖:利用乙醇沉淀法从羊栖菜中提取。
海带多糖:利用乙醇沉淀法从海带中提取。

海藻 为马尾藻科植物海蒿子或羊栖菜的藻体。咸寒,归肝肾经,有消痰软坚,利水消肿之作用。《本草纲目》中记载:海藻,现咸能润下,寒能泄热引水,故能消瘿瘤,结核之坚聚,而除浮肿、脚气、痰气之湿热,使邪气自小便出也。
昆布 为海带科植物海带或翅藻科植物昆布的叶状体。咸寒,归肝肾经,有消痰软坚,利水消肿之作用。《别录》记载昆布,主十二种水肿,瘿瘤聚结气。
本实验中将用羊栖菜和海带
羊栖菜[Sargassum fusiforme (Harv.) Setch]:藻体黄褐色,肥厚多汁,高15~40cm。固着器为是北太平洋西部特有的暖温带植物,属褐藻类马尾藻科。是一种营养丰富的藻类,干品每百克含蛋白质10.6克,糖类47克,灰分18.3克,脂肪1.3克,钙1400毫克,磷100毫克,钾4400毫克,铁5.5毫克,胡萝卜素550毫克;还有多种维生素和微量元素。
海带[Laminaria japonica Aresch]属褐藻门海带科,是一种大型食用海藻,有丰富的营养。每100克海带中含有蛋白质8克, 甘露醇14克,钾4.36克、铁150毫克,超过菠菜,油菜几倍至几十倍。更为突出的是,海带富含微量元素碘,每100克海带含碘高达24000微克。
多糖提取工艺
取海藻置于托盘放入恒温培养箱低温烘干,用电磨机打碎,使之成粉末状。用天平称取海藻粉50g放入500ml锥形瓶中加蒸馏水250ml放置于95℃水浴锅中,并隔10min晃一次,4h后取出,冷却到室温。离心取上清液,在离心管中加无水乙醇,得到沉淀再次离心,取沉淀(多糖),用蒸馏水冲洗数遍,于37度烘箱中烘干所得沉淀为粗多糖。

2.培养基:MRS肉汤培养基:
蛋白胨10g、肉浸膏10 g、酵母膏5g、葡萄糖20 g、吐温80 1ml、K2HPO42g、醋酸钠5g、柠檬酸铵2g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、蒸馏水1000ml。pH值6.4。
20%肉汤:蛋白胨1g、肉浸膏1g、蒸馏水1000ml。pH值6.4。
3.菌株:取自丽珠肠乐胶囊(由双歧杆菌制成的干粉胶囊),珠海丽珠医药集团股份有限公司,批号20030404。
4.实验仪器
Nbox Jar 7.0L,法国生物梅里埃公司
S.C.303型隔水式电热恒温培养与试剂
厌氧培养盒GE箱,嘉兴新睦电器厂
除氧剂,法国生物梅里埃公司
LD4-2高速离心机,北京医用离心机厂
754型紫外可见分光光度计,上海第三分析仪器厂
TG328B电光分析天平
THZ-82型恒温振荡器,江苏太仓医疗器械厂

(二)实验方法与结果
1.菌液
与溶液制备
菌液制备:无菌条件下,从丽珠肠乐胶囊中取出内容物,溶解于10ml浓度为0.9%的无菌生理盐水,搅拌均匀后用接种针蘸取少许溶液,涂布于无菌MRS固体培养基平板上,37℃下,于厌氧培养盒培养3d。再从平板中挑取色泽淡黄、圆滑突起的单菌落,接入40ml MRS液体培养基,37℃厌氧培养2d。取少量培养液,测得菌液浓度为2.7×108个/ml。使用前稀释至1.0×108个/ml备用。转贴于 中国

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