机能实验学的一般知识和技能

另味怪友
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2020年06月18日 16:42
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地铁四惠东-徐策

机能实验学的一般知识与技能
机能实验学是一门研究生物正常机能、疾病发生机制以及药物作用规律的
新兴的基础医学课程。它继承并发展了生理学、病理生理学和药理学这三门学
科实验课的核心内容,主要是一种验证性实验,以及延续的实验都能在书上找
到相应的理论支持。机能实验更加强调学科之间的交叉融合,更加重视新技术
的应用与发展,更加注重学生创新能力的培养。学习了这门实验学的知识,对
将来进入临床工作,或者外出研修、从事科研都有着受益匪浅的作用。
一、实验目的:
1、通过实验来验证相关的理论知识,进一步将理论知识转化为实践的操作能
力,对知识巩固、强化和总结、加强理解和记忆。学会观察、分析和解决
问题。
2、培养学生掌握基本的操作技能。
3、培养学生对科学工作具备严谨的态度、严格的要求以及严密的科学思维方
法。
二、实验要求:
1、实验前
(1)尽可能的预习实验教材,实际上也相当于对相关理论知识的复习。是对理
论的一种验证和再现,要在实验前预习每次实验课的内容、目的、要求、
关键步骤和注意事项。
(2)根据实验内容,复习准备相关的知识、查阅相关的书籍。
(3)尽可能的预测每个实验步骤可能会出现的结果,做到心中有数,预估可能
出现的问题和误差,对未预期的结果进行合理的分析、解释。
2、实验中
(1)自觉遵守实验室规章制度,穿工作服按时上课,不要进行与实验无关的
操作。
(2)认真观察老师示教,检查器材是否完备,爱护仪器设备和动物标本等,
节约药品,仔细认真完成实验。
(3)合理分工,以小组为单位,尽可能地在不同实验项目中人人都有均等的
学习机会,都能够得到锻炼,共同完成实验。
(4)对于实验结果,要求实事求是的记录,客观、准确、及时、仔细耐心地
观察实验现象,并联系理论进行思考。
3、实验后
(1)清点、清洗实验器材,并按规定摆放整齐。
(2)整理,分析实验结果,认真书写实验报告,按时递交给任课老师。
三、实验报告的书写
原则:忠实、准确、及时、客观
1、t要求:将实验报告指装订成册,在封面写上机能实验报告,班级、姓名、
学号、任课老师。
2、t内容:首行正中写标题
(1)实验目的:就是本次实验所要验证的理论点
(2)实验对象:动物(蟾蜍,小白鼠和家兔)
(3)实验方法:简述重要环节
(4)实验结果:真实记录
实验结果表达方式有:①叙述式②表格式③简图式
对于实验中得到的结果数据,一般称为原始资料,又分为两类:
计量资料:以数
据的大小来表示变化的程度
计数资料:清点数目得到的结果
(5)t实验讨论:将记录到的结果,根据已知的理论知识对其进行概括、归
纳。或把规律性的结果总结使之上升为一种理论。
(6)t实验结论:是与实验目的相呼应,要求用一句话概括。
四、一般知识与技能
选用动物做实验,对临床一些疾病的研究具有重大的意义,但是对于不同
的实验项目,应根据需要选择不同的动物。
1、实验动物的选择
原则(1)与人类各方面机能相近(有研究价值)
(2)标准化动物(即遗传背景明确,饲养环境与动物体内微生物得
以控制,符合一定标准的实验动物)
(3)敏感动物
(4)操作简单,经济实惠
种类(1)小白鼠:体型小,价格便宜,繁殖快,易于饲养。
适用于动物需要量大的实验。如药物的筛选,半数致
死量的测定,抗癌药的研究。
(2)大白鼠:性情凶猛。
常用于科研课题的研究。
(3)蛙类:通常选用蟾蜍,它是两栖类动物,冷血变温
低温动物特点:新陈代谢慢,生存环境简单,容易模仿,常用
于离体实验。
(4)家兔:哺乳类动物、性情温顺,便于静脉注射和灌胃。可用于
直接记录血压、呼吸及观察药物对心血管功能的影响的实验,也
可用于中枢兴奋药和利尿药的实验。
2、动物的捉拿、称重固定
(1)小白鼠:捉拿固定
用右手提起鼠尾,将其放在粗糙面上,当其向前爬行时,用左手抓住其头
颈部皮肤,再置小鼠于左手心,用手指夹住其肢体以固定
称重:用天平称重,使用天平前先调零,单位:克(g)
(2)家兔:捉拿:右手抓颈部皮肤,左手托起臀部,将重心置于左手上,切忌
抓两兔耳或肾区。
称重:用台秤称重(同样,使用前先调零),单位:千克,公斤
固定:兔盒固苦定(本次课示教介绍)
兔台固定:仰卧背位交叉法
3、动物的标记
较大的动物可以直接将号码牌挂于颈部。一般选用3%-5%苦味酸溶液涂于
体表不同部位的毛上。
苦味酸学名三硝基苯酚,是一种黄色液体,颜色鲜艳,不易褪去。
标记顺序:从左→右,上→下,前→后。
Eg:小鼠缺氧实验中一共需用6只小鼠,需标记以防混淆。
4、给药方法
(1)灌胃法
(2)注射法(介绍注射法前先讲下注射器的使用)
① 安装注射器时,针头剖面应与注射器刻度保持在同一个方向,并且朝上以
利于药液顺利进入血管,也便于观察注射剂量与速度。
② 在抽取药液后须将注射器内的空气排出,以免将
空气注入血管内形成气
栓,将针头竖直向上,垂直排气,不要对准他人。新式针管的乳突部都是
在中间,而旧式的则偏向一侧,那么要注意排气时用略倾斜。
③ 进针时右手食指持住针头跟部与乳突部的连接处的部位,其余手指持住注
射器以防针头的脱落。进针后用左手大拇指固定进针处,进针长度约为针
头的1/2。
主要介绍三种注射法:
小白鼠腹腔注射:一般选用全量为1ml的注射器,那么每大格0.2ml,每小格
0.02ml。可用手抓取并固定,用注射器在下腹部左侧或右侧后
1/3略靠外侧,与皮肤呈30°角,向头的方向刺入腹腔有脱空
感后,回抽若无回血,无尿液,无消化道内容物表示进入腹
腔,可以推注药物。
家兔耳缘静脉注射:耳缘静脉沿耳背内侧走行,用湿棉球浸润局部,用手指轻
弹血管处使静脉充盈(压迫近心端则充盈更佳)。用左手中
指和示指夹住兔耳根部,用拇指和无名指捏住耳尖,右手持
注射器,针头与血管呈20°角,从耳尖部进针(应先选用
静脉远端注射,逐渐移向近端,以便尽量多地保留完好静脉
作重复穿刺用,所谓静脉穿刺,点点逼近),而后将针尖沿
血管走向刺入静脉。此时用左手拇指压住针头固定之。右手
将药液缓慢推入。如感推注困难或发现注射部位局部肿胀,
变白,则说明针尖没有刺入静脉,而是皮下,应将针尖拔出
并重新注射。注射完毕,拔出针头,用干棉球压迫止血1-
2min。
皮下注射:(凡是皮下,都是在脊部进行的)
左手将鼠的背部皮肤捏起,右手将注射器水平刺入有脱空感即可。注
入以后会鼓起一个小丘,给予适当的按摩,以便促进吸收,有时需要
注射药物多时可以分散注射。
5、麻醉
(1)目的:为了实验或手术过程中减少动物的痛苦,保持安静,便于操作。
(2)方法:局麻(利多卡因,普鲁卡因,丁卡因):浸润性强,阻断AP传导。
全麻:吸入麻醉:(乙醚,氯仿)将动物置于密闭的容器中,容器
加盖,用棉球蘸麻醉药放入瓶中,动物吸入麻醉药蒸汽而被麻醉。
静脉麻醉:20%乌拉坦:5ml/kg,易溶于水,一次给药可维持4-5h,
麻醉过程较平稳,动物无明显挣扎现象。
3%-5%戊巴比妥钠:1ml/kg,发生作用快。
(3)麻醉剂量要准,根据体重计算出用药量,是保守量,参考值,应先遵循先
快后慢,边推药边观察的原则,将总量分成三等份,前1/3应快,中
1/3应稍快,后1/3应缓慢。不同动物个体对麻醉剂量耐受性不同。灰兔
比白兔抵抗力强,妊娠兔耐受性低。
(4)最佳麻醉指标:①肌张力:全身肌
肉松弛
②痛觉反射:用手夹捏其前爪指甲沟,若无回缩现象,说
明麻醉程度适宜。
③角膜反射:剪一根兔须,用根部扎角膜,反射迟钝为最
佳程度。
④呼吸:缓慢,规则且平稳。
6、动物的处死
(1)颈椎脱臼法:常被用于小白鼠,用左手拇指,示指固定鼠头部,右手捏住
鼠尾,用力向后上方牵拉,听到“咔嚓”声即表明颈椎脱
位,脊髓断裂,鼠瞬间死亡。
(2)断头毁脑法:用于蟾蜍,用金属探针经枕骨大孔破坏脑和脊髓而使动物死
亡。
(3)空气栓塞法:
(4)心脏取血法:(家兔)注射器垂直刺入心脏,抽取大量血液。
(5)大动脉放血:(家兔)颈总动脉,股动脉放血。
(6)过量麻醉法:(豚鼠)麻醉量3倍以上。
五、常用的生理溶液
生理溶液即生理代用液,人工配制在体外模仿体液成分,代替体液的生理
功能的溶液,用来维持离体器官的正常生命活动。
1、 生理盐水
两栖类:0.65%Nacl溶液
维持血浆与渗透压相等,维持内环境稳定
哺乳类:0.9% Nacl溶液
2、t 生理代用液
(1)任氏液:
Na,KL离子→维持生物电生理现象
Ca离子→维持肌细胞收缩
缓冲对→维持PH值稳定,酸碱平衡
(2)台式液:
除含有任氏液的充分外,还有Mgcl2,Nah2po4,葡萄糖等。哺乳类生
理代用液
六、给药量计算
1、给药浓度的表示方法
(1)百分比浓度:每100份溶液或固体物质中所含药物的分数,通常有三种表
示方法:
① 重量/体积(w/v)表示法:每100ml溶液中所含药物的克数
② 重量/重量 (w/w) 表示法:每100g制剂中所含药物的克数
③ 体积/体积 (v/v) 表示法:每100ml溶液中所含药物的毫升数
(2)比例浓度:表示稀释溶液的浓度
Eg.1:1000肾上腺素溶液 即1000ml溶液中含有肾上腺素1g.
2、举例说明
(1)小鼠重18g,ip吗啡10mg/kg,给药浓度为0.1%,应注射多少毫升
(2)配制75%酒精150ml,应用95%酒精多少毫升?







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